Fenilgalactósido CAS:2818-58-8

Efeito na atividade enzimática: O fenilgalactosídeo é comumente usado para medir a atividade da enzima β-galactosidase.Quando o fenilgalactósido é hidrolisado pela β-galactosidase, libera p-nitrofenol.O acúmulo de p-nitrofenol pode ser medido quantitativamente, fornecendo informações sobre a atividade da β-galactosidase.Este efeito é aproveitado em aplicações como ensaios enzimáticos e sistemas de triagem.

Análise de expressão gênica: O fenilgalactosídeo é frequentemente usado como substrato em experimentos de biologia molecular para estudar a expressão gênica.O gene lacZ, que codifica a β-galactosidase, é comumente fundido com sequências reguladoras de outros genes de interesse.A expressão do gene lacZ e a hidrólise do fenilgalactosídeo pela β-galactosidase podem indicar o padrão de expressão e o nível do gene alvo em estudo.

Sistemas de triagem: O fenilgalactosídeo é um componente importante dos sistemas de triagem que utilizam a atividade da β-galactosidase.Um exemplo amplamente conhecido é o método de triagem azul-branco, usado para identificar células recombinantes ou transformadas em experimentos de biologia molecular.As colônias que absorveram com sucesso o DNA recombinante ou sofreram recombinação genética expressarão β-galactosidase, levando à hidrólise do fenilgalactosídeo e à formação de uma cor azul.

Purificação de proteínas: Em alguns casos, o fenilgalactosídeo pode ser usado como ligante para cromatografia de afinidade para purificar proteínas que se ligam especificamente ou são ativadas pela β-galactosidase.A proteína de interesse pode ter um marcador de afinidade ou um marcador de fusão contendo um domínio de ligação à β-galactosidase.Ao passar a mistura de proteínas através de uma coluna com fenilgalactósido imobilizado, a proteína desejada pode ser retida selectivamente e subsequentemente eluída.