2-NITROFENIL-BETA-D-GLUCOPIRANOSÍDEO CAS:2816-24-2

Substrato enzimático: O ONPG é comumente usado como substrato para a beta-galactosidase, uma enzima que hidrolisa o ONPG para produzir um composto de cor amarela (o-nitrofenol) que pode ser facilmente detectado espectrofotometricamente. Essa reação enzimática pode ser usada para medir a atividade da beta-galactosidase, tornando o ONPG uma ferramenta valiosa em estudos de enzimologia.

Ensaios de biologia molecular: O ONPG é usado como substrato em diversos ensaios de biologia molecular, particularmente em ensaios com o gene repórter beta-galactosidase. Nesses ensaios, um substrato à base de ONPG é usado para medir a atividade do gene repórter, que geralmente é regulada por uma sequência promotora específica de interesse. A atividade da beta-galactosidase, indicada pela mudança de cor produzida pela hidrólise do ONPG, fornece informações valiosas sobre a atividade do promotor.

Análise da expressão gênica: O ONPG também é utilizado na análise da expressão gênica. Ao ligar a sequência promotora de interesse ao gene da beta-galactosidase, os pesquisadores podem medir a atividade da beta-galactosidase utilizando o ONPG como substrato. O nível de atividade da beta-galactosidase reflete a força e a atividade do promotor, permitindo a avaliação dos níveis de expressão gênica.

Aplicações diagnósticas: O ONPG pode ser usado em aplicações diagnósticas, particularmente na detecção de microrganismos patogênicos. Diversas bactérias, como a Escherichia coli e certas espécies de Shigella e Salmonella, produzem beta-galactosidase, que pode clivar o ONPG. Essa reação de hidrólise produz uma mudança de cor visível, que pode ser usada para determinar a presença dessas bactérias em amostras clínicas.